Awọn ọja

Ibajẹ Oxidative si awọn ipilẹ DNA nigbagbogbo ni abajade dida awọn purines oxidized, paapaa 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG) ati 7,8-dihydro-8-oxoadenine (8-oxoA), iṣaaju jẹ daradara- mọ mutagenic egbo.Niwọn igba ti 8-oxoG ti wa ni imurasilẹ ni imurasilẹ si ifoyina siwaju ni akawe pẹlu awọn ipilẹ deede, fifi sii ipilẹ kan lakoko iṣelọpọ DNA ni ilodi si fọọmu oxidized ti 8-oxoG ni a ṣewadii ninu vitro.Awoṣe sintetiki ti o ni ọgbẹ 8-oxoG kan ni a kọkọ ṣe itọju pẹlu oriṣiriṣi awọn oxidants elekitironi kan tabi labẹ awọn ipo atẹgun ẹyọkan ati lẹhinna tẹriba si itẹsiwaju alakoko catalyzed nipasẹ Klenow fragment exo- (Kf exo-), calf thymus DNA polymerase alpha (pol alpha) ) tabi DNA polymerase beta (pol beta).Ni ibamu pẹlu awọn ijabọ iṣaaju, dAMP ati dCMP ti fi sii ni yiyan idakeji 8-oxoG pẹlu gbogbo awọn polymerases DNA mẹta.O yanilenu, ifoyina ti 8-oxoG ni a rii lati fa dAMP ati ifibọ dGMP ni idakeji ọgbẹ nipasẹ Kf exo- pẹlu idinamọ igba diẹ ti itẹsiwaju alakoko o ti n waye ni aaye ti ipilẹ ti a yipada.Pẹlupẹlu, ọgbẹ naa jẹ bulọki lakoko iṣelọpọ DNA nipasẹ pol alpha ati pol beta.Awọn idanwo pẹlu awoṣe oligonucleotide ti o tunṣe 8-oxoA fihan pe mejeeji 8-oxoA ati fọọmu oxidized ti 8-oxoA ifibọ taara ti dTMP nipasẹ Kf exo-.Itupalẹ spectrometric Mass ti 8-oxoG-ti o ni awọn oligonucleotides ṣaaju ati lẹhin ifoyina pẹlu IrCl62-ni ibamu pẹlu ifoyina ti aaye 8-oxoG ni akọkọ, ti o yọrisi dida ẹda guanidinohydantoin bi ọja pataki.Ko si ẹri fun dida awọn aaye ipilẹ ti a gba.Awọn abajade wọnyi ṣe afihan pe fọọmu oxidized ti 8-oxoG, o ṣee ṣe guanidinohydantoin, le ṣe itọsọna aiṣedeede ati aiṣedeede ti awọn dNTP lakoko iṣelọpọ DNA.Ti iru ilana ba waye ni vivo, yoo ṣe aṣoju ọgbẹ mutagenic ojuami ti o yori si awọn iyipada G->T ati G->C.Bibẹẹkọ, fọọmu oxidized ti o baamu ti 8-oxoA ni akọkọ ṣe afihan fifi sii T ti o tọ lakoko iṣelọpọ DNA pẹlu Kf exo-.