Awọn ọja

Iru si awọn ọlọjẹ RNA-okun rere miiran, awọn ọlọjẹ tombus jẹ ẹda nipasẹ eka ẹda ẹda ti o ni ibatan si awo ilu (VRC).VRC naa ni p92 ti o ni koodu RNA ti o gbẹkẹle RNA polymerase (RdRp), ọlọjẹ p33 RNA chaperone, ati ọpọlọpọ awọn ọlọjẹ agbalejo ti o yan.Lati le di RdRp ti n ṣiṣẹ lẹhin itumọ rẹ, amuaradagba ẹda p92 yẹ ki o dapọ si VRC, atẹle nipa imuṣiṣẹ rẹ.A ti ṣe afihan tẹlẹ ninu agbeyẹwo ti o da lori iwukara ti ko ni sẹẹli pe imuṣiṣẹ ti ọlọjẹ bushy stunt Tomato (TBSV) RdRp nilo ifosiwewe (s) agbalejo kan tiotuka.Ninu àpilẹkọ yii, a ṣe idanimọ amuaradagba mọnamọna ooru cellular 70 (Hsp70) gẹgẹ bi ifosiwewe agbalejo ti a ti yọ kuro ti o nilo fun imuṣiṣẹ ti TBSV RdRp atunko N-terminally truncated.Ni afikun, idinamọ orisun-moleku kekere ti iṣẹ Hsp70 ṣe idilọwọ iṣelọpọ RNA nipasẹ tombusvirus RdRp in vitro.Pẹlupẹlu, a fihan pe awọn phospholipids didoju, eyun, phosphatidylethanolamine (PE) ati phosphatidylcholine (PC), mu ilọsiwaju RdRp ṣiṣẹ ni vitro.Ni idakeji, phosphatidylglycerol (PG) ṣe afihan ipa idilọwọ ti o lagbara ati ti o ni agbara lori imuṣiṣẹ in vitro RdRp.A tun ṣe afihan pe PE ati PC ṣe iwuri ibaraenisepo RdRp-viral plus-strand RNA [(+) RNA], lakoko ti PG ṣe idiwọ ifaramọ ti RNA gbogun ti si RdRp.Da lori awọn ipa iyanju dipo awọn ipa inhibitory ti ọpọlọpọ awọn phospholipids ni imuṣiṣẹ tombusvirus RdRp, a daba pe akopọ ọra ti awọn membran subcellular ti a fojusi le jẹ lilo nipasẹ awọn ọlọjẹ tombusvirus lati ṣe ilana apejọ VRC tuntun lakoko ipasẹ ikolu. (RdRp), eyiti o jẹ iduro fun sisọpọ awọn ọmọ-ọmọ RNA gbogun ti ninu awọn sẹẹli ti o ni akoran ti ọpọlọpọ awọn ọlọjẹ RNA-okun rere, ko ṣiṣẹ ni ibẹrẹ.Ilana yii ṣee ṣe lati yago fun iṣelọpọ RNA gbogun ninu cytosol ti yoo yara ja si ifilọlẹ awọn idahun antiviral cellular ti o fa RNA.Lakoko apejọpọ eka ẹda ti o ni asopọ awo ilu, gbogun ti RdRp yoo di mimuuṣiṣẹ nipasẹ ilana ti oye ti ko pe ti o jẹ ki RdRp lagbara ti iṣelọpọ RNA.Nipa lilo TBSV RdRp, a fihan pe cellular Hsp70 chaperone ti a ṣajọpọ ati didoju phospholipids dẹrọ imuṣiṣẹ RdRp ni fitiro.Ni idakeji, phosphatidylglycerol (PG) ni ipa inhibitory ti o ni agbara lori imuṣiṣẹ in vitro RdRp ati ibaraenisepo RdRp-viral RNA, ni iyanju pe microdomain membranous ti o yika RdRp ni ipa pupọ si agbara rẹ fun iṣelọpọ RNA.Nitorinaa, imuṣiṣẹ ti gbogun ti RdRp seese da lori ọpọlọpọ awọn paati ogun ninu awọn sẹẹli ti o ni akoran.