Awọn ọja

Ju 70% ti awọn gliomas-kekere gbe iyipada heterozygous R132H ninu ifaminsi pupọ fun isocitrate dehydrogenase 1 (IDH1).Eyi funni ni henensiamu pẹlu agbara aramada lati yi α-ketoglutarate pada si 2-hydroxyglutarate, nikẹhin ti o yori si tumorigenesis.Orisun pataki ti iṣelọpọ 2-hydroxyglutarate jẹ glutamine, eyiti, ninu akàn, tun jẹ orisun fun anaplerosis tricarboxylic acid cycle (TCA).Orisun miiran ti anaplerosis jẹ ṣiṣan pyruvate nipasẹ pyruvate carboxylase (PC), eyiti o jẹ ọna ti o wọpọ ni awọn astrocytes deede.Idi ti iwadi yii ni lati pinnu boya PC jẹ orisun ti TCA anaplerosis ni awọn sẹẹli mutant IDH1 nibiti a ti lo glutamine fun iṣelọpọ 2-hydroxyglutarate.Immortalized deede eniyan astrocytes ti a ṣe atunṣe lati ṣe afihan heterozygous mutant IDH1 tabi IDH1 iru-igi ni a ṣe iwadi.Flux ti pyruvate nipasẹ PC ati nipasẹ pyruvate dehydrogenase (PDH) jẹ ipinnu nipa lilo spectroscopy resonance oofa lati ṣe iwadii isamisi ti [2-¹³C] glukosi ti ari ¹³ C-labe led glutamate ati glutamine.Awọn idanwo iṣẹ ṣiṣe, RT-PCR ati didi iwọ-oorun ni a lo lati ṣe iwadii ikosile ati iṣẹ ṣiṣe ti awọn ensaemusi ti o yẹ.Awọn data akàn Genome Atlas (TCGA) ni a ṣe atupale lati ṣe ayẹwo ikosile ti awọn enzymu ninu awọn ayẹwo glioma eniyan.Ti a bawe si awọn sẹẹli-iru-ẹgan, awọn sẹẹli IDH1 mutant ti o pọju pọ si iṣan-ẹjẹ ida nipasẹ PC.Eyi ni nkan ṣe pẹlu ilosoke pataki ninu iṣẹ PC ati ikosile.Ni akoko kanna, iṣẹ PDH dinku ni pataki, o ṣee ṣe ni ilaja nipasẹ pipọ inhibitory PDH phosphorylation pupọ nipasẹ PDH kinase 3. Ni ibamu pẹlu akiyesi ninu awọn sẹẹli, itupalẹ data TCGA ṣe afihan ilosoke pataki ninu ikosile PC ni IDH mutant-ifihan awọn ayẹwo glioma eniyan ni akawe si egan- Iru IDH.Awọn awari wa daba pe awọn iyipada ninu PC ati PDH le jẹ apakan pataki ti isọdọtun cellular si iyipada IDH1 ati pe o le ṣiṣẹ bi awọn ibi-afẹde itọju ailera ti o pọju.